無(wú)血清細(xì)胞凍存液原位凍存方式：從培養(yǎng)狀態(tài)良好的細(xì)胞培養(yǎng)板中將培養(yǎng)基上清吸取干凈，再加入適量細(xì)胞凍存液于培養(yǎng)孔板中，充分浸潤(rùn)細(xì)胞，蓋上蓋板，做好密封措施，防止染菌，然后直接將含凍存液的細(xì)胞培養(yǎng)板放入-80℃冰箱，冷凍保存。
 

　　無(wú)血清細(xì)胞凍存液原位復(fù)蘇方式：從冰箱取出凍存培養(yǎng)板，立即放入37℃水浴槽中快速解凍。待凍存的細(xì)胞懸液*融化后，輕輕吸去細(xì)胞凍存液，按照常規(guī)換液操作加入新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。
 

　　凍存管凍存方式：按照常用方法收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞于試管中，按照培養(yǎng)細(xì)胞密度和所用細(xì)胞凍存管的尺寸計(jì)算所需凍存細(xì)胞數(shù)。取相當(dāng)于所需細(xì)胞數(shù)的細(xì)胞懸浮液量，置于離心管中，離心收集培養(yǎng)細(xì)胞。移去離心管中的上清液，再加入適量細(xì)胞凍存液于離心管中，緩慢混合均勻，制成細(xì)胞混合液。將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)示的冷凍保存管中，直接將含細(xì)胞懸液的凍存管放入-80℃冰箱，冷凍保存。
 

　　無(wú)血清細(xì)胞凍存液注意事項(xiàng)：細(xì)胞凍存液在凍存細(xì)胞分裝后，應(yīng)減少在外存放時(shí)間，盡快移入-80℃超低溫冰箱。選擇凍存處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞有助于提高復(fù)蘇細(xì)胞存活率。對(duì)于干細(xì)胞(ES細(xì)胞)，原代細(xì)胞等凍存時(shí)，應(yīng)該事先將所凍存的細(xì)胞進(jìn)行至少為期一周的干產(chǎn)品試驗(yàn)性細(xì)胞凍存培養(yǎng)，確認(rèn)性能后在進(jìn)行正式凍存。